4-Nitrofenil beta-D-galattopiranoside CAS:200422-18-0

Effettu: L'ONPG hè un substratu specificamente utilizatu per rilevà a presenza è l'attività di l'enzima β-galactosidasi. Quandu l'enzima β-galactosidasi hè presente è attiva, scinde l'ONPG in dui prudutti: o-nitrofenolu è un derivatu di galattosiu. A liberazione di o-nitrofenolu provoca un cambiamentu di culore giallu, chì pò esse misuratu cù un spettrofotometru.

Applicazione: L'ONPG hà parechje applicazioni in a ricerca di biologia moleculare è biochimica:

Determinazione di l'attività di a β-galattosidasi: L'ONPG hè cumunamente adupratu per misurà è quantificà l'attività di l'enzima β-galattosidasi. A velocità di furmazione di o-nitrofenolu, chì hè direttamente proporzionale à l'attività di l'enzima, pò esse misurata spettrofotometricamente.

Espressione è regulazione di i geni: L'ONPG hè spessu utilizatu in esperimenti ligati à l'espressione è à i studii di regulazione di i geni. Hè spessu utilizatu in i testi di proteine ​​di fusione, cum'è u sistema di fusione lacZ cumunemente utilizatu, per studià l'espressione di i geni sottu u cuntrollu di promotori specifici. L'attività di beta-galactosidasi misurata cù l'ONPG furnisce infurmazioni nantu à u livellu di espressione genica.

Screening per l'attività di β-galactosidasi: L'ONPG pò esse adupratu cum'è metudu di screening culurimetricu in a tecnulugia di u DNA ricombinante per identificà a presenza è a funziunalità di u genu LacZ, chì codifica a β-galactosidasi. Stu metudu di screening aiuta à identificà i cloni chì cuntenenu u genu d'interessu.

Studi di cinetica enzimatica: L'ONPG hè ancu utile per studià a cinetica di l'enzima β-galactosidasi. Misurendu a velocità di reazione enzima-substratu à diverse concentrazioni di substratu, hè pussibule determinà parametri cinetici cum'è e custanti di Michaelis-Menten (Km) è e velocità massime di reazione (Vmax).